食用玉米淀粉含量測定

首法 酶水解法

　　一、目的與要求：

　　1、明確與掌握各類食品中淀粉含量的原理及測定方法。

　　2、掌握用酶水解法和酸水解法測定淀粉的方法。

　　二、原理

　　樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖，再用鹽酸將雙糖水解成單糖，結(jié)尾按還原糖測定，并折算成淀粉。

　　三，試劑：

　　1、0.5%淀粉酶溶液：稱取淀粉酶0.5克，加100毫升水溶解，數(shù)滴甲苯或三氯甲烷，防止長霉，貯于冰箱中。

　　2、碘溶液：稱取3.6克碘化鉀溶于20毫升水中，加入1.3克碘，溶解后加水稀釋至100毫升。

　　3、乙醚

　　4、85%乙醇

　　5、6N鹽酸：量取50毫升鹽酸加水稀釋至100毫升。

　　6、甲基紅指示液：0.1%乙醇溶液。

　　7、20%氫氧化鈉溶液。

　　8、堿性酒石酸銅甲液：稱取34.639克硫酸銅(CuS04·5H2O)。加適量水溶解，加0.5毫升硫酸，再加水稀釋至500毫升，用精制石棉過濾。

　　9、堿性酒石酸銅乙液：稱取173克酒石酸鉀鈉與50克氫氧化鈉，加適量水溶解，并稀釋至500毫升，用精制石棉過濾，貯存于橡膠塞玻璃瓶內(nèi)。 

　　10、0.1000N高錳酸鉀標準溶液。

　　11、硫酸鐵溶液：稱取50克硫酸鐵，加入200毫升水溶解后，人100毫升硫酸，冷后加水稀釋至1000毫升。 

　　四、操作方法： 

　　1、樣品處理：

　　稱取2-5克樣品，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪，再用約100毫升85%乙醇洗去可溶性糖類，將殘留物移入250毫升燒杯內(nèi)，并用50毫升水洗濾紙及漏斗，洗液并入燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上加熱15分鐘，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20毫升淀粉酶溶液，在55-60℃保溫1小時，并時時攪拌。然后取1滴此液加1滴溶液，應不顯現(xiàn)藍色，若顯藍色，再加熱糊化并加20毫升淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍色為止。加熱至沸，冷后移入250毫升容量瓶中，并加水至刻度，混勻，過濾，棄去初濾液。取50毫升濾液，置于250毫升錐形瓶中，并加水至刻度，沸水浴中回流1小時，冷后加2滴甲基紅指示液，用20%氫氧化鈉溶液中和至中性，溶液轉(zhuǎn)入100毫升容量瓶中，洗滌錐形瓶，洗液并人100毫升容量瓶中，加水至刻度，混勻備用。

　　B、測定：

　　吸取50毫升處理后的樣品溶液，于400毫升燒杯內(nèi)，加入25毫升堿性酒石酸銅甲液及25毫升乙液，于燒杯上蓋一表面皿，加熱，控制，在4分鐘內(nèi)沸騰，再準確煮沸2分鐘，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或c4垂融坩堝抽濾，并用60℃熱水洗滌燒杯及沉淀，至洗液不呈堿性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400毫升燒杯中，加25毫升硫酸鐵溶液及25毫升水，用玻棒攪拌使氧化亞銅完全溶解，以0.1000N高錳酸鉀標準溶液滴定至微紅色為終點。

　　同時量取50毫升水及與樣品處理時相同量的淀粉酶溶液，按同一方法

　　做試劑空白實驗。

　　計算：X1=((A1-A2)×0.9)/( m1×50/250×V1/100×1000)×100

　　X1：樣品中淀粉的含量，%；

　　A1：測定用樣品中還原糖的含量，mg；

　　A2：試劑空白中還原糖的含量，mg；

　　0.9：還原糖(以葡萄糖計)換算成淀粉的換算系數(shù)；

　　m1：稱取樣品質(zhì)量，g；

　　V1：測定用樣品處理液的體積，毫升(m1)。

　　第二法 酸水解法

　　一、原理：

　　樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用酸水解成具有還原性的單糖，然后按還原糖測定，并折算成淀粉。

　　二、試劑：

　　1、乙醚；

　　2、85%乙醇溶液；

　　3、6N鹽酸溶液；

　　4、40%氫氧化鈉溶液；

　　5、10%氫氧化鈉溶液；

　　6、甲基紅指示液：0.2%乙醇溶液

　　7、精密PH試紙

　　8、20%乙酸鉛溶液

　　9、10%硫酸鈉溶液

　　10、乙醚

　　11、堿性酒石酸銅甲液。 (配制見前)

　　12、堿性酒石酸銅乙液； (配制見前)

　　13、硫酸鐵； (配制見前)

　　14、0.1000N高錳酸鉀標液

　　三、儀器：

　　1、水浴鍋

　　2、高速組織搗碎機：1200r/min

　　3、皂化裝置并附250毫升錐形瓶。

　　四、操作方法：

　　1、 樣品處理

　　A、糧食，豆類、糕點、餅干等較干燥的樣品，稱取2.0-5.0克磨碎過40目篩的樣品，置于放有慢速濾紙的漏斗中，用30毫升乙醚分三次洗去樣品中的脂肪，棄去乙醚。再用150毫升85%乙醇溶液分數(shù)次洗滌殘渣，除去可溶性糖類物質(zhì)。并濾干乙醇溶液，以100毫升水洗滌漏斗中殘渣并轉(zhuǎn)移至250毫升錐形瓶中，加入30毫升6N鹽酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2小時?；亓魍戤吅?，立即置流水中冷卻。待樣品水解液冷卻后，加入2滴甲基紅指示液，先以40%氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色，再以6N鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏色較深，可用精密PH試紙測試，使樣品水解液的PH約為7。然后加20毫升20%乙酸鉛溶液，搖勻，放置10分鐘。再加20毫升10%硫酸鈉溶液，以除去過多的鉛。搖勻后將全部溶液及殘渣轉(zhuǎn)入500毫升容量瓶中，用水洗滌錐形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液20毫升，濾液供測定用。

　　B、蔬菜、水果、各種糧豆含水熟食制品：按1：1加水在組織搗碎機中搗成勻漿(蔬菜、水果需先洗凈、晾干、取可食部分)稱取5-10克勻漿(液體樣品可直接量取)，于250毫升錐形瓶中，加30毫升乙醚振搖提取(除去樣品中脂肪)，用濾紙過濾除去乙醚，再用30毫升乙醚淋洗兩次，棄去乙醚。以下按A自“再用150毫升85%乙醇溶液”起依法操作。

　　2、測定：

　　吸取50毫升處理后的樣品溶液，于400毫升燒杯內(nèi)，加25毫升堿性酒石酸銅甲液及25毫升乙液。于燒杯上蓋一表面皿加熱，控制在4分鐘沸騰再準確煮沸2分鐘，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或G4垂融坩堝抽濾，并用60℃熱水洗滌燒杯及沉淀，至洗液不呈堿性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400毫升燒杯中，加25毫升硫酸鐵溶液及25毫升水，用玻棒攪拌使氧化銅完全溶解，以0.1000N高錳酸鉀標液滴定至微紅色為終點。

　　同時吸取50毫升水，加與測樣品時相同量的堿性酒石酸銅甲乙液、硫

　　酸鐵溶液及水，按同一方法做試劑空白試驗。

　　計算： x2=((A3-A4)×0.9)/( M2×V2/500×100)------------------------×100